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生物活性方法

生物活性方法主要包括生物活性物質的提取方法和生物活性物質的測試方法。

一、提取方法:

水溶液提取法:適用於提取水溶性、鹽溶性的生物活性物質。使用水或稀酸、稀鹼、稀鹽溶液,這些溶劑提供了一定的離子強度、pH值及相當的緩衝能力。例如,胰蛋白酶可以用稀硫酸提取,肝素可以用pH9的3%氯化鈉溶液提取。

表面活性劑提取法:表面活性劑兼具親水基團和疏水基團,能在水-油界面發揮分散、乳化和增溶作用。適用於提取與細胞結構結合牢固的生物高分子,如蛋白質或酶。常用的表面活性劑包括吐溫類(Tween 20、40、60、80)、Span和Triton系列等。

有機溶劑提取法:適用於提取水不溶性的脂類、脂蛋白、膜蛋白結合酶等。常用有機溶劑包括乙醇丙酮丁醇等。

二、測試方法:

等溫滴定量熱法(Isothermal Titration Calorimetry, ITC):是一種研究生物熱力學與生物動力學的方法。它通過高靈敏度、高自動化的微量量熱儀連續、準確地監測和記錄變化過程的量熱曲線,提供熱力學和動力學信息。ITC主要用於測定受體-配體複合物的結合常數和熱力學參數。

光譜分析法:是基於輻射與物質相互作用時,測量物質內部發生量子化的能級躍遷而產生的電磁輻射(光譜)的波長和強度而建立的分析方法。光譜法是研究物質的化學組成、結構和狀態的重要分析方法。

以上方法共同構成了生物活性方法的體系,涵蓋了從生物活性物質的提取到測試的整個過程。