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雙去氧鏈終止法

雙脫氧鏈終止法,也稱為Sanger雙脫氧鏈終止法,是DNA測序的一種技術。它主要由弗雷德里克·桑格在1977年發明。這種方法的基本原理是在DNA複製或轉錄過程中,通過在四管反應系統中分別按比例引入四種雙脫氧核苷酸。當雙脫氧核苷酸摻入到正在延伸的DNA鏈的末端時,由於雙脫氧核苷酸缺少能夠與下一個核苷酸形成磷酸二酯鍵的羥基,從而使得DNA鏈的延伸在此終止。這樣,每管反應體系中都會合成一系列長度不等的核酸片段,這些片段的3'端都是雙脫氧核苷酸。

反應結束後,這些核酸片段通過電泳進行分離。由於片段的長度不同,它們在電泳中的遷移速度也不同,從而在電泳膠上形成不同的帶。每個帶代表一種特定的雙脫氧核苷酸,通過分析這些帶的順序,就可以推斷出原始DNA鏈的核苷酸序列。

這種方法在DNA基因分析和遺傳學研究中得到了廣泛套用。