在不同文化和神話中，雙頭蛇有著豐富的象徵意義：
雙頭蛇在希臘神話中象徵著天後赫拉。赫拉是一位善妒的女神，不允許宙斯與其他女性有染，並會懲罰那些背叛他的女性及其後代。雙頭蛇在這裡代表著女性的保護力量，它能夠幫助赫拉使用魔法懲罰情敵。在某些傳說中，雙頭蛇與智慧和治癒相關聯，如古希臘的醫神阿斯克勒庇俄斯就手持蛇杖，象徵醫療、治癒和智慧。雙頭蛇也象徵著重生、變革和成長，這與蛇在蛻皮時展現的新生和變革過程有關。
在阿茲特克文化中，雙頭蛇同樣具有重要的象徵意義。它被視為偉大的羽蛇神奎茲特克的象徵，代表著重生和復活。阿茲特克人認為蛇是天地力量的結合，象徵著永恆與重生。