高壓蒸汽滅菌鍋的操作流程大致如下：
檢查滅菌器。首先檢查滅菌器壓力表是否為零，排氣儲存桶水位線是否位於高水位和低水位之間，如果低於低水位，需加入蒸餾水並擰緊蓋子。
準備滅菌物品。將待滅菌物品用牛皮紙或錫紙包裹，確保整體被包裹，特別是裝有溶液的瓶子，不應擰緊，需留有小口。
加水。在外層鍋內加入適量的水，使水位與三角擱架持平，水量應充足，以覆蓋物品，但不宜過多，以免影響蒸汽流通。
裝鍋。將包裹好的物品放入滅菌器內，注意不要過緊或過滿，特別是含有培養基的容器應立放或適度傾斜，以防污染棉塞。
關閉鍋蓋並密封。使用配套的扳手對稱地旋緊螺母，確保鍋蓋密封良好。
設定參數。通常滅菌參數設定為105kPa、121℃、15~30分鐘，可根據具體物品調整。
加熱和排氣。打開電源開關，加熱滅菌器至設定溫度，同時排出冷空氣，確保鍋內溫度達到要求。
維持壓力和溫度。當鍋內壓力和溫度達到設定值後，維持一段時間。
斷電和排氣。滅菌結束後，讓溫度自然冷卻，然後慢慢打開排氣閥以排除餘氣，注意打開鍋蓋時不要靠近蒸汽出口，以防燙傷。
取出滅菌物品。待鍋內壓力降至零後，打開鍋蓋取出滅菌物品。
操作高壓蒸汽滅菌鍋時，務必遵循安全指南，確保個人安全。