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bradford法

Bradford法,也稱為考馬斯亮藍法,是一種廣泛套用於生物學和醫學研究中用於測定溶液中蛋白質濃度的技術。這一方法基於染料考馬斯亮藍G-250與蛋白質結合的能力,具體特點如下:

原理。在酸性環境下,考馬斯亮藍G-250與蛋白質的鹼性胺基酸(如精氨酸)和芳香族胺基酸(如酪氨酸)結合,形成藍色複合物。這種複合物在595nm波長下的吸光值與蛋白質的濃度成正比,從而可以通過測定吸光值來確定蛋白質的濃度。

優點。這種方法具有高靈敏度,最低可檢測到1μg的蛋白質,檢測速度快,通常在10至20分鐘內完成,操作簡便,不需要特殊儀器,且試劑穩定,可重複性好。

套用。Bradford法廣泛套用於發酵酶法工藝藥物研發食品工業等領域中的蛋白質含量測定。它還用於測定化藥中總蛋白殘留的檢測,如抗生素等藥物。

局限性。雖然Bradford法具有許多優點,但它也有一些局限性。例如,它可能受到樣品中某些化學物質(如去垢劑、還原劑和金屬螯合劑)的影響。因此,在使用時需要確保樣品中這些物質的濃度不會干擾測定。

總之,Bradford法是一種快速、靈敏且操作簡便的蛋白質定量方法,適用於多種套用場景。然而,在使用時應注意其局限性,以確保結果的準確性。