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loading buffer的作用

Loading buffer電泳實驗中發揮著至關重要的作用,其主要功能包括:

指示作用。Loading buffer中含有指示劑,如溴酚藍二甲苯氰,它們可以在電泳過程中改變顏色,幫助研究者觀察電泳的進程,從而適時終止電泳。

增加樣品密度。由於Loading buffer中的成分如甘油的存在,它可以增加樣品的密度,使得樣品密度大於TAE,有助於樣品沉降到點樣孔中,防止樣品在電泳過程中飄出點樣孔。

促使蛋白質或聚合酶變性。SDS(十二烷基硫酸鈉)是Loading buffer的成分之一,它能使蛋白質變性,破壞蛋白質的高級結構,使所有蛋白質表面均勻帶上負電荷,只留下分子量作為影響電泳遷移速度的因素。此外,巰基乙醇等還原劑有助於破壞蛋白質中的二硫鍵,進一步促使蛋白質變性。

保持蛋白質線性。Loading buffer中的成分有助於保持蛋白質的線性狀態,確保其在電泳過程中的行為符合預期。

總的來說,Loading buffer通過其成分和特性,確保了電泳實驗的準確性和可靠性。