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mtt法

MTT法,全稱MTT比色法,是一種廣泛套用於生物學和醫學研究中的技術,用於檢測細胞的存活和生長。其檢測原理基於活細胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶,該酶能夠將外源性的MTT(一種黃色染料)還原為不溶於水的藍紫色結晶甲臢(Formazan),這種結晶主要沉積在細胞中。而死細胞則沒有這種功能。通過使用二甲基亞碸DMSO)溶解細胞中的甲臢結晶,並利用酶聯免疫檢測儀在490nm波長處測定其光吸收值,可以間接反映出活細胞的數量。在一定細胞數範圍內,MTT結晶形成的量與活細胞數成正比。

MTT法的優點包括高靈敏度和經濟性,它已被廣泛套用於生物活性因子的活性檢測、抗腫瘤藥物的大規模篩選、細胞毒性試驗以及腫瘤放射敏感性測定等領域。但該方法也有一些局限性,例如生成的Formazan結晶需要溶解後才能檢測,這增加了工作量並可能影響測定結果的準確性。此外,使用的DMSO溶劑對人體具有明顯毒性,需要注意安全。

在使用MTT法時,需要注意MTT的配製和實驗步驟,確保無菌操作,並採取適當的安全措施,如戴手套以防止MTT的致癌性。此外,MTT法只能測定細胞的相對數和相對活力,而不能測定細胞的絕對數。