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sec方法

SEC方法,全稱體積排除色譜(Size Exclusion Chromatography),是一種基於分子體積大小進行分離的色譜技術。它適用於分離大分子樣品,如蛋白質核酸以及合成聚合物等,並且廣泛套用於分子量及其分布的測定。SEC方法的原理是基於分子篩效應,其中不同體積的分子通過凝膠柱時,較大的分子被凝膠的孔隙阻擋,而較小的分子則可以進入凝膠內部並較早被洗脫出來。

SEC方法的特點包括:

簡單性:它不涉及分子間的化學反應,僅依據分子體積大小進行分離。

廣泛套用:適用於合成聚合物的分子量分布測定,以及大分子樣品的分離純化。

高效性:能夠快速分離樣品中分子量相差較大的組分,適用於未知樣品的初步探索分離。

無需複雜實驗:能夠提供樣品組成分布的全面概況,無需進行複雜的實驗操作。

SEC方法的具體套用包括:

凝膠過濾色譜法GFC):主要用於分離水溶性大分子,如葡萄糖系列,常用凝膠為葡聚糖凝膠,洗脫溶劑主要是水。

凝膠滲透色譜法GPC):主要用於有機溶劑中可溶的高聚物相對分子質量分布分析及分離,常用凝膠為交聯聚苯乙烯凝膠,洗脫溶劑為四氫呋喃等有機溶劑。

SEC方法可以通過離心或重力流進行操作,結合特定的技術如Exo-spin™,可以高效分離外泌體等特定目標物,提高樣品的純度。這種方法不僅適用於大體積樣本,也適用於小體積樣本,且操作簡單,無需特殊設備。