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ta克隆原理

TA克隆是一種分子生物學技術,主要用於將PCR擴增得到的DNA片段克隆到載體中。這一過程依賴於PCR擴增時,通常在DNA片段的3'端添加的一個額外的「A」(即3'-A突出端)。TA克隆使用的載體是特製的,其3'端帶有一個「T」(即3'-T突出端)。這樣,帶有「A」的PCR產物和帶有「T」的載體可以在T4 DNA連線酶的作用下,通過A-T鹼基互補配對的方式連線起來,從而將目的DNA片段插入到載體中。

這種克隆方法的一個主要優點是它不需要使用限制性內切酶來切割DNA片段或去除載體的甲基化,因此比傳統的克隆方法更快、更簡單。TA克隆廣泛套用於分子克隆實驗中,是一種獲得目的基因序列、獲得大量基因片段、保存基因片段的重要手段。