「於」在古代漢語中具有多種用法，主要作為介詞使用，可以介紹動作的時間、地點、人物等，相當於現代漢語中的「在」「到」「從」「對」「給」「向」「由於」「因為」「與」「跟」「比」「被」等義。
「於」字在古代句子中用於表示地點，如「君子於役，不知其期」，意指「君子在服役中，不知道期限」。還可以表示方向，如「向」或「對」，例如在《孟子》中的「赴訴於王」。
此外，「於」也可用於構成被動句，表示動作的接受者，例如「不拘於時」。當「於」放在形容詞之後時，可以引出比較的對象，如「寒於水」，意為「比水冷」。在某些情況下，「於」作為動詞後綴，沒有實際意義，例如《詩經》中的「黃鳥于飛」。