馬里奧角色介紹如下：
馬里奧。該角色是義大利籍美國人，站在遊戲頂峰的超人氣多面角色。馬里奧靠吃蘑菇成長，特徵是大鼻子、頭戴帽子、身穿背帶褲，還留著鬍子，與他的雙胞胎弟弟路易吉一起長年擔任任天堂的招牌角色。
路易吉。該角色是馬里奧的雙胞胎弟弟，最早被設計出來作為2P操作的角色。路易吉是個性格內向、希望過平靜生活的人。
奇諾比可。該角色是由奇諾比奧衍生出來的女性角色，日文的名稱是キノピコ，其中「コ」的意思是女孩，通常用在日本女孩的名字裡。奇諾比可的特徵是活潑可愛，是蘑菇王國的成員，非常擔心碧姬公主的安全，因此必要時會隨著馬里奧一起冒險。
耀西。該角色是一隻恐龍，也是馬里奧的好朋友，耀西從馬里奧的嬰孩時期就已經認識。耀西的飲食習慣和睡眠習慣使其成為一個活躍的角色。
瓦里奧。該角色是一個貪婪、奸詐的角色，是馬里奧的競爭對手和死對頭。瓦里奧以其獨特的外貌特徵和性格在遊戲中扮演重要角色。
庫巴（Bowser）。該角色是遊戲中的大魔王，一個巨大身軀背上有巨刺甲殼的邪惡凶暴生物，通過搶走碧琪公主來挑戰馬里奧。
碧琪公主（Peach）。該角色是蘑菇王國的公主，以其金色長髮和粉紅長裙的外觀而聞名。碧琪公主經常被庫巴綁架，然後由馬里奧救回。
這些角色共同構成了《超級馬里奧兄弟》的核心，每個角色都有其獨特的性格、外觀和在遊戲中的角色定位。