草缸油膜的形成主要有以下幾個原因：
自來水中含有的少量雜質和有機物，在水缸中一段時間後，這些有機物中的油脂會溶於水中並浮出水面形成油膜。
藻類是草缸油膜的另一箇來源。藻類的組織大約八成由油脂質構成，當藻類死亡腐爛後，油脂溶解於水中並浮出水面。
水草爛葉也是一箇因素。水草表面爲臘質，當水草老化腐爛後，葉面的臘質溶解於水中並浮出水面。
飼料中的油脂在投餵過程中會移動到水面形成油膜。
魚類的糞便排泄物中也含有油脂，這些油脂擴散到水中並在水面形成油膜。
空氣中的灰塵和遊離油脂也會因水面張力的不同而附着在水面上，形成油膜。
水中的有機質分子富集凝結在水體表面，由異養菌分解形成的菌膜也可能是油膜的來源之一。
此外，水草缸油膜的形成還與水草腐爛的枝葉、死亡的魚蝦屍體在缸內分解有關。