酒泉特色文化豐富多彩，涵蓋了多種非物質文化遺產項目，反映了該地區深厚的歷史底蘊和多元的文化融合。酒泉市的非物質文化遺產項目包括河西寶卷（酒泉寶卷）、酒泉夜光杯雕、敦煌曲子戲、肅北蒙古族服飾、阿克塞哈薩克族阿依特斯、肅北蒙古族祝讚詞等六個項目被列入國家級非物質文化遺產代表性項目名錄。
河西寶卷（酒泉寶卷）是一種流行的民間講唱文學，具有深厚的歷史文化價值，對民間教化和弘揚傳統美德有積極作用。酒泉夜光杯雕是甘肅肅州區的傳統工藝，具有悠久的歷史。敦煌曲子戲、肅北蒙古族服飾、阿克塞哈薩克族阿依特斯和肅北蒙古族祝讚詞等項目，同樣體現了酒泉地區多元文化的特色。
除了這些國家級非遺項目，酒泉市還有多個省級、市級和縣級非物質文化遺產代表性項目名錄。這些項目涵蓋了多種傳統藝術和手工藝，如肅北蒙古族學校的蒙古族特色校園文化活動，包括搏克、射箭、蒙古象棋等課程。
酒泉市還重視非物質文化遺產的保護傳承工作，通過加強領導、全面普查、加大投入、強化培訓、重視宣傳和注重研究等措施，積極推進整體性保護工作。校園成為了非遺傳承的新陣地，如酒泉職業技術學院通過搭建非遺教學實踐平台、構建非遺教學課程體系等活動，使職業教育與非遺深度融合。