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dapi染色方法

DAPI染色是一種常用的螢光染色方法,用於標記細胞核。以下是詳細的DAPI染色步驟:

準備試劑。DAPI染料(例如,從AbMole生物購買,目錄號為M5107,1mg/mL的濃度),DAPI染料工作液(使用PBS或合適的稀釋液將DAPI儲備液稀釋至1μg/mL),4%多聚甲醛溶液作為固定液,0.1%Triton X-100溶液作為滲透液,以及抗褪色劑如VECTASHIELD Mounting Medium。

實驗步驟。將細胞種植在適當的載玻片或培養皿中,直至達到適當的生長狀態。用PBS洗滌細胞2~3次,每次5分鐘。加入4%多聚甲醛溶液,靜置15~20分鐘以固定細胞。再用PBS洗滌細胞2~3次。加入0.1%Triton X-100溶液,靜置5~10分鐘以滲透細胞。用PBS洗滌細胞2~3次。加入1μg/mL DAPI染料稀釋液,靜置5~10分鐘以染色細胞核。用PBS洗滌細胞2~3次。使用抗褪色劑封片,然後使用螢光顯微鏡觀察細胞核的形態和數量。

DAPI染色的最佳濃度通常在0.5~10μg/ml範圍內。染色時間根據實驗材料和所需染色強度進行調整,一般在5~20分鐘之間。