勵志

勵志人生知識庫

mtt怎麼做

MTT(3-(4,5-二氫-3-甲基-5-異噁唑基)-2,5-二苯甲酮)是一種常用的檢測細胞活性的化合物。在MTT實驗中,通常包括以下步驟:

細胞接種。首先,將細胞培養至對數生長期,並用胰酶消化下來。然後,用移液槍將細胞懸液定量接種到96孔板中,每孔加入100μl細胞懸液,以確保待測細胞的密度爲5000~10000/孔。

加藥處理。根據實驗設計,將藥物(溶解在DMSO中的溶液)加入到96孔板中,設置多箇復孔,每孔100μl,以便於後續的數據統計和分析。

MTT染色。將96孔板中的培養基吸出,用PBS洗板三次,去除未貼壁的細胞和殘留的培養基。然後,加入適量的MTT試劑,使MTT與細胞接觸並染色。接着,繼續培養4小時。

溶解細胞並測定吸光度。當MTT染色完成後,用DMSO溶解細胞並終止反應。然後,用酶標儀測定各孔的吸光度值,記錄數據並進行分析。

數據處理和分析。根據吸光度值計算細胞的存活率和抑制率,並繪製細胞存活曲線。同時,比較不同藥物處理組之間的差異和顯著性,撰寫實驗報告或論文。

需要注意的是,MTT是一種有毒物質,操作時需要採取適當的防護措施。此外,MTT的保存和使用有特定的要求,例如需要避光,並在4℃下保存。