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ripa裂解液配方

RIPA裂解液的配方有多種變體,主要差異在於所含有的去垢劑和抑製劑的種類及濃度。以下是一些常見的RIPA裂解液配方:

強效RIPA裂解液。包含50mM Tris-HCl(pH 7.4),150mM NaCl,1% Triton X-100,0.5% 脫氧膽酸鈉,0.1% SDS,以及正釩酸鈉、氟化鈉、EDTA等抑製劑。

中效RIPA裂解液。包含50mM Tris-HCl(pH 7.4),150mM NaCl,1% NP-40,0.5% 脫氧膽酸鈉,0.1% SDS,以及正釩酸鈉、氟化鈉、EDTA等抑製劑。

溫和RIPA裂解液。包含50mM Tris-HCl(pH 7.4),150mM NaCl,1% NP-40,0.25% 脫氧膽酸鈉,以及正釩酸鈉、氟化鈉、EDTA等抑製劑。

此外,使用RIPA裂解液進行實驗時,還需要考慮細胞或組織樣品的處理,例如,對於貼壁細胞,應先用PBS、生理鹽水或無血清培養液洗滌一遍,然後加入適量的裂解液並刮下或用槍吹打使細胞充分裂解;對於懸浮細胞,需要先離心收集細胞,再加入裂解液並輕彈以充分裂解細胞;對於組織樣品,應將組織剪下成細小碎片後加入裂解液並進行勻漿以充分裂解。裂解後的樣品通常需要離心以去除不溶物質,並收集上清液進行後續的實驗操作,如Western Blot、免疫沉澱等。