Western blot（也稱為蛋白質免疫印跡）是一種重要的生物實驗技術，主要用於檢測和分析特定的蛋白質。其基本原理是在聚丙烯醯胺凝膠電泳（SDS-PAGE）中分離細胞或組織中的蛋白質，然後將這些蛋白質轉移到固相支持物（如硝酸纖維素膜或PVDF膜）上，通過特異性抗體檢測目標抗原。
Western blot廣泛套用於多個領域，包括分子生物學、生物化學、免疫遺傳學等。其主要套用於以下幾個方面：
基因在蛋白水平的表達研究。通過Western blot可以檢測特定基因表達後的蛋白質產物，分析其表達水平、修飾狀態等。
抗體活性檢測。Western blot是評估抗體特異性和靈敏度的常用方法，通過與已知抗原的蛋白質標準品比較，可以評估抗體的質量和適用性。
疾病早期診斷。某些疾病的早期階段，特定的蛋白質可能會異常表達。Western blot可用於檢測這些異常蛋白質，幫助疾病的早期診斷和治療。
蛋白質的定性和定量分析。Western blot可以分析特定蛋白質的分子量、等電點、修飾狀態等，以及在複雜樣品中的相對或絕對含量。
Western blot的一般流程包括蛋白樣品的製備、蛋白定量、SDS-PAGE、轉膜、封閉、抗體雜交（一抗和二抗）、以及最終的檢測。其中二抗通常標記有酶或螢光基團，用於放大信號便於檢測。這種方法具有高靈敏度和良好的特異性，能夠檢測低至1ng的靶蛋白。