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梯度平板法

梯度平板法是一種用於篩選抗藥性突變株的方法。該方法通過在培養皿中製作一個藥物濃度梯度,使得一側藥物濃度較高,另一側較低。具體操作步驟如下:

準備培養皿:首先,將培養皿的一側抬高約5mm,倒入約10ml融化的瓊脂培養基,待其凝固。

倒入含藥培養基:然後將培養皿放回水平位置,倒入等體積含有適當濃度藥物的相同培養基。這樣處理後,培養基內的藥物濃度會呈現線性梯度。

塗布菌懸液:在平板上塗布經過誘變的菌懸液。經過培養後,某些突變的菌株可以在適當藥物濃度的培養基表面生長。

篩選抗藥性突變株:選擇在較高藥物濃度下生長的菌株進行分離培養,即可得到抗藥性突變株。

通過這種方法,可以有效地篩選出抗藥性突變株,因為高濃度的藥物會殺死大多數野生型菌株,而抗藥性突變株則能在較高藥物濃度下存活並形成菌落。